定义：按照人们的愿望，通过转基因等技术，赋予生物新的遗传性质

限制性内切核酸酶(限制酶)

来源：主要是从原核生物中分离钝化出来的

功能：能够识别双链DNA分子的特定核苷酸序列，并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸的磷酸二酯键断开

结果：形成粘性末端或平末端

DNA连接酶

作用：将双链DNA拼接起来，恢复被限制酶切开的两个核苷酸之间的磷酸二酯键

运载体

  1. 载体的作用
    1. 将外源基因转移到受体细胞中去
    2. 利用载体在受体细胞中大量复制外源细胞
  2. 具备条件
    1. 能在受体细胞中稳定保存并复制
    2. 具有一至多个限制酶切点，供外源DNA片段切入其中
    3. 具有标记基因，便于重组DNA分子的筛选
    4. 大小合适，方便操作
    5. 对受体细胞无害
  3. 种类：质粒，噬菌体，动植物病毒等

PCR的条件和过程

条件：

  1. 模板：DNA母链
  2. 原料：四种脱氧核苷酸(dNTP)
  3. 引物：使DNA聚合酶能够从引物的3’端开始连接脱氧核苷酸
    1. 长度通常为20-30个脱氧核苷酸(特异性较强)
    2. 引物自身不应有互补序列导致其自身折叠，也不应存在互补引物
    3. PCR中有两种引物(两条链)
  4. 耐高温的聚合酶(Taq DNA聚合酶)
  5. 缓冲液，$Mg^{2+}$ ：提供合适的酸碱度和某些离子(Taq DNA聚合酶需要 $Mg^{2+}$)

过程：

  1. 变性($90^\circ C$ 以上)，DNA之间氢键被破坏，断开成两条DNA单链