定义:从动物体中提取出相关组织,分散成若干个单一细胞,然后在适宜的条件下让这些细胞生长和增值的技术

动物细胞培养:

取材:取自胚胎或刚出生不久的幼龄动物的组织或器官(细胞增殖能力强)

分散成单个细胞培养的原因:与大块组织相比,分散为单个细胞后更好培养,细胞所需的营养更好供应,其代谢产物更好排出,另外可以使细胞水平的其他技术得以实现,一般用机械的方法,胰蛋白酶,胶原蛋白酶来分散

细胞贴壁:
体内培养的细胞可以分为两大类:一类可以悬浮在培养液中繁殖,另一类则需要贴附于某些基质表面才可以生长增殖,大多数细胞属于这种类型,这类细胞往往要贴附于培养瓶壁上,这种现象成为细胞贴壁,需要满足培养瓶或培养皿无毒,光滑,易粘附

接触抑制:
贴壁细胞生长到互相接触(一层)时,细胞就会停止分裂增殖的现象(癌细胞无接触抑制现象,可形成多层细胞)

过程

  1. 取动物组织块
  2. 切碎组织
  3. 用胰蛋白酶等处理分散为单个细胞
  4. 制成细胞悬液,转入培养液中进行原代培养
  5. 对贴满瓶壁的细胞使用胰蛋白酶,再次分散为单个细胞
  6. 分瓶,进行传代培养

原代培养:分瓶前的培养过程,即动物组织块的初次培养过程

传代培养:将分瓶后的细胞培养称为传代培养,对于悬浮于培养液的细胞可以直接用离心法处理,对于贴壁细胞则需要用胰蛋白酶等进行处理,使其变为单个细胞,然后将收集到的细胞制成细胞悬液,分瓶处理

干细胞培养及其应用

分布:早期胚胎,骨髓和脐带血等多种组织和器官中
类型:胚胎干细胞,成体干细胞等

胚胎干细胞:
存在于早期胚胎中,具有分化为成年动物体中任意一种细胞,并进一步形成机体中的所有组织和器官的潜能

成体干细胞:
成体组织内的干细胞,包括骨髓中的造血干细胞,神经系统中的神经干细胞 和 睾丸中的精原干细胞等

动物细胞融合

定义:两个或多个动物细胞结合形成一个细胞的过程,也成为细胞杂交

原理:细胞膜的流动性

诱导方法:PEG融合法(聚乙二醇),电融合法和灭活病毒诱导法

意义:突破了有性杂交的局限性,使远缘杂交成为可能